本研究通过构建具有过表达及沉默功能的PNC-2304-35S-TcSYP121 (OE)、PNC-TRV2-TcSYP121 (VI)的GV3101农杆菌菌株转化中国柽柳,对转化后的中国柽柳OE、VI与野生型(CK)进行表型观测、盐腺情况分析、生理生化指标测定及该基因相对表达量情况,探究了转基因中国柽柳的耐盐能力。结果如下:
(1)OE柽柳经盐胁迫处理后叶片发黄并伴随轻微萎蔫现象;VI柽柳经盐胁迫处理后叶片发黄,出现萎蔫和脱落现象;
(2)OE柽柳经NBT和DAB染色后均比CK颜色浅,VI柽柳染色后比CK颜色深;此外,OE柽柳经盐胁迫后失水率升高,Na+升高、K+降低,SOD和POD活性显著升高,VI柽柳则表现出失水率降低,Na+降低、K+升高,SOD和POD活性降低的现象;
(3)OE柽柳中的TcSYP121基因表达量在盐胁迫下升高,而VI柽柳中的TcSYP121基因表达量下降;
本试验通过瞬时转化TcSYP121基因,获得了过表达和沉默的中国柽柳,通过对表型变化、生理及基因表达的测定,探究了转基因中国柽柳的耐盐能力,从而证明TcSYP121基因能够提高柽柳的耐盐性。